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荸荠皮提取5-异戊烯基金鱼草素的方法

2016-02-22 10:20:22点击:

一种荸荠皮提取5‑异戊烯基金鱼草素的方法,其具体步骤如下:

(1)将新鲜的荸荠皮风干,粉碎,备用;以重量计,称取荸荠皮粉末1份,加入提取罐中,每次加入4‑10份70%体积百分比的丙酮水溶液,在25℃下浸泡24h,浸泡3次,过滤,合并滤液,减压浓缩至膏状,获得提取物。

(2)以重量计,将提取物1份分散在5份体积的水中制成悬浊液,用1‑2份水体积的乙酸乙酯萃取3次,合并萃取液,减压浓缩至干,获得萃取物;

(3)往萃取物中加入甲醇至完全溶解,用2‑4倍萃取物质量的聚酰胺拌样,将甲醇挥发至干,装柱,连接MCI柱进行中压分离,以40‑100%体积百分比的甲醇水溶液为流动相梯度洗脱,薄层色谱法检测,收集合并流动相浓度为70‑90%体积百分比的洗脱液,减压浓缩,获得粗品A;

(4)往粗品A中加入甲醇至完全溶解,用2‑4倍质量的聚酰胺拌样,将甲醇挥发至干,转入聚酰胺色谱柱进行分离,用体积比为3:1‑1:1的氯仿‑甲醇溶液洗脱,薄层色谱法检测,收集合并含有5‑异戊烯基金鱼草素的洗脱液,减压浓缩,获得粗品B;

(5)以重量计,将粗品B1份,溶于4‑8份甲醇中,加入等体积的水制成悬浊液,用Sephadex LH‑20凝胶色谱柱纯化,用甲醇洗脱,薄层色谱法检测,收集合并含有5‑异戊烯基金鱼草素的洗脱液,减压浓缩,获得粗品C;将所得粗品C再次用Sephadex LH‑20凝胶色谱纯化,用70%体积百分比的甲醇水溶液洗脱,薄层色谱法检测,收集合并含有5‑异戊烯基金鱼草素的洗脱液,减压浓缩,干燥,获得含量达95%以上的5‑异戊烯基金鱼草素产品。

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