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來源: 發布時間:2025-07-03

外泌體研究思路。外泌體研究通常與高通量測序的聯系緊密,研究思路可以分為三大類:表達譜、分子標志物和分子機制方向,其中表達譜思路的特點就是短平快、通常以測序數據為主要內容,短平快發表3-5分文章。而分子標志物的特點是在表達譜基礎之上加入大量樣本驗證,建立ROC、KM曲線,分析分子與臨床疾病的相關性為主,通常文章影響因子在3-10分之間。分子機制研究,顧名思義要做到細胞功能、機制研究深度,因此工作量通常較大,影響因子通常能夠上10+。唐山正規外泌體提取試劑產品介紹在體內參與細胞通訊、細胞遷移、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過程,與多種疾病的發生和進程密切相關。由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體,大于一般蛋白質。廈門外泌體提取試劑推薦廠家

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由于這些核酸被囊膜包裹而被保護,穩定性高,不易降解,是一種用于一些病癥診斷和預后監測的非常理想的新型生物標記物一些疾病的早期診斷、用藥監控、預后判斷。近年來,隨著人們對外泌體的研究和認識加深,外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點技術已被許多臨床科研機構普遍地應用于一些病癥和疾病的無創診斷、治病和監測;如何高效地提取外泌體是實現這項新興液體活檢技術臨床常規化應用的關鍵。外泌體(Exosome)是從體液(尿液、血液、唾液、腹水、胸腹水等)和細胞液中快速提取的,其是活細胞分泌到胞外的囊泡樣小體,含有多種蛋白和核酸分子(DNA、RNA、以及miRNA),在體內細胞間物質和信號轉導中起到重要作用。蕪湖正規外泌體提取試劑廠家直銷外泌體提純試劑盒的特色與優勢:無需蛋白酶處理。

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外泌體的提取方法:1、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態完整等優點,但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實驗,難以普遍普及。2、多聚物沉淀法。聚乙二醇(PEG)為常用的多聚物,可與疏水性蛋白和脂質分子結合共沉淀,早先應用于從血清等樣本中收集病毒,現在也被用來沉淀外泌體,其原理可能與競爭性結合游離水分子有關。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題:比如純度和回收率低,雜蛋白較多(假陽性),顆粒大小不均一,產生難以去除的聚合物,機械力或者吐溫-20等化學添加物將會破壞外泌體等

外泌體與肺病預后:外泌體mirRNA和蛋白質被認為是NSCLC的預后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預后的生物標志物時發現,外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外,還有研究表明,低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復發率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發現,NY-ESO-1是其中對低生存率有顯著影響的標志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統分析了28位NSCLC患者體內的365種miRNA,其中let-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調,進一步研究發現,let-7f和miR-30e-3p水平可以區分早期和晚期NSCLC患者,高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預后密切相關。如何高效地提取外泌體是實現這項新興液體活檢技術臨床常規化應用的關鍵。外泌體的特殊結構和功能,使得它具有潛在的應用價值,可以作為診斷多種疾病的生物指標。

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有的外泌體分離方法需要高速離心,需要使用大型機器,耗費近24小時的時間才能獲得,非常不便。而高離心力也可能破壞囊泡。降低樣品的質量。這項研究有望解決這一難題。在論文中,研究人員們提供了一種通過微流體和聲學的獨特組合從體液樣品中捕獲外泌體的新穎方法。他們開發的原始聲學分選裝置由兩個傾斜的聲學換能器和一個微流體通道組成,當這些傳感器產生的聲波相互碰撞時,形成產生一系列壓力節點的駐波。每當細胞或顆粒流過通道并遇到一個節點時,壓力會將細胞引導離開中心一點點。細胞移動的距離取決于大小和其他屬性(如可壓縮性),這樣,當到達通道末尾時,不同大小和性質的細胞就能夠被分離開來。這種方法分離得到的外泌體,基本上不改變其生物或物理特征,為開發評估人類健康以及疾病診斷和進展提供了有吸引力的新方法。通過密度梯度離心,樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。長沙外泌體提取試劑報價

外泌體提取:可分離到大小相近的囊泡顆粒。廈門外泌體提取試劑推薦廠家

外泌體(Exosomes)是細胞分泌到胞外的一種囊泡(ExtracellularVesicles,EVs),其大小為30-150nm,具有雙層膜結構和茶托狀形態,含有豐富的內含物(包括核酸、蛋白和脂質等),參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養上清以及各種體液中,包括血液、唾液、尿液、乳汁等,同時也存在于組織樣本中,如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。腦組織分離方法簡述:將腦組織剪成薄片,放入離心管中加上消化液進行消化,經水浴、反復輕輕上下顛倒,再用移液間斷緩慢吹吸至消化結束。隨后加入培養基于消化液中,混勻,置于冰上。再進行一系列的差速超速離心過程,包括除雜、濾膜過濾、超離等。較后用PBS重懸外泌體,用重懸后的外泌體進行下面的透射電鏡(TEM)、納米粒徑追蹤分子(NTA)和markerWB鑒定。廈門外泌體提取試劑推薦廠家

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