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單分子的檢測原理：由Simoa數字免疫分析法實現的超靈敏度已在先前討論過。簡而言之，類似免疫分析中的酶-底物反應是在相對較大的反應體積（50-100μL）中進行的，在信號生成步驟中稀釋了產物分子。信號分子的擴散和稀釋將靈敏度限制在皮摩爾范圍內。相比之下，Simoa通過將單獨標記的免疫復合物和底物限制在飛升大小的孔中，從而限制了熒光產物分子從酶-底物反應中的擴散。當單一酶標簽催化底物轉化為熒光產物時，產生的熒光團被限制在孔中，從而在短時間內產生可測量的熒光信號。 數字化ELISA芯片，幫您數字化高靈敏檢測，且微量樣本多重指標檢測；醫療檢測用數字ELISA快速檢測

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陣列芯片原理：從15μLof基質中的500,000個珠子開始。結果表明，陣列圖像的定量分析大約一半的孔在珠子沉降幾分鐘后被占據。對于SimoaHD-1分析儀，沉降時間減少到90秒，分布在三個儀器處理周期之間。隨著珠子重新沉降到陣列中，儀器對其他操作（密封和成像）進行索引，這些操作已經加載到陣列上。通常，會檢測25,000-50,000個珠子。由于Simoa中的測量單位（AEB）是一個比率，一定珠裝載量的差異不影響數據質量或在大多的范圍內保持精度，前提是存在足夠的珠子數量以保持在泊松噪聲水平之上。22數據質量會受到影響，當泊松噪聲主導測量誤差時。這發生在與背景相關的正井數量降至約50個珠子以下時，此時泊松噪聲明顯影響測量的變異系數（CV）。 陣列單分子數字ELISA購買靈活芯棄疾JX-8B單分子ELISA檢測產品，微量樣本可同時測2-4個指標；！

   芯棄疾JX-8B數字ELISA產品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測SiMoA通過將單個酶產生的熒光團限制在極小范圍內，從而能夠檢測到非常低濃度的酶標記物體積（~50fL），導致熒光產物分子的局部高濃度。為了在免疫測定中實現這種定位，在第二步中，將珠子加載到一個陣列為離散的微升大小的孔（圖1C）。本研究中使用的2毫米寬陣列有~50,000個孔，孔徑為μm，孔深為μm。加載后的陣列在含有熒光酶底物液滴的情況下，用橡膠密封圈密封。Rissin等人，第3頁將每個微球隔離在飛升反應室中。具有單一酶的微球標記的免疫復合物在50飛升的反應室中產生局部高濃度的熒光產物（圖1D）。通過使用標準顯微鏡光學系統獲取陣列的時間變化熒光圖像，可以區分與單一酶分子相關的微球（“開啟”孔）和不與酶相關的微球（“關閉”孔）；顯示了“開啟”和“關閉”孔的熒光直方圖。成像陣列可以成千上萬的單個免疫復合物同時檢測。通過測定供試品中的蛋白質濃度來確定計算含有珠子和熒光產物的孔數相對于含有珠子的孔數。使用SiMoA，濃度是因此，我們稱SiMoA應用于檢測單個免疫復合物為數字ELISA。

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參考的其他高靈敏檢測方法：

兩種更多測試的模擬分析信號放大技術是免疫PCR和生物條形碼分析。免疫PCR通過將檢測抗體標記為DNA分子，然后使用PCR進行擴增和定量，從而提高靈敏度。生物條形碼分析利用了與DNA“條形碼”標記的抗分析物納米顆粒，這些納米顆粒在與捕獲在金微粒上的分析物結合后，從納米顆粒上脫雜以進行定量。這兩種方法相對于傳統免疫分析法的靈敏度提高了10到100倍，但尚未整合到所需的全自動系統中，也未用于多重分析。為了比較大限度地加速藥物發現、驗證新型生物標志物并將分子水平診斷引入臨床主流，需要一種具有高效率、高質量數據和成本效益的穩健、多重超靈敏蛋白質檢測技術。 超多重檢測芯片在普查中篩選高特異性標記物組合，提升早期診斷準確性。

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為了證明檢測極低濃度的可能診斷價值使用數字ELISA檢測血液中的蛋白質，對接受治理性前列腺切除術（RP）的患者血清樣本中的PSA進行了測量。PSA是前列腺病的血清生物標志物病癥既用作篩查工具，也用于監測住院患者的復發接受治理性前列腺切除術28。治理性前列腺切除術后，絕大多數PSA被消除，水平低于標準商用檢測方法的檢測限（3pM或0.1ng/mL)。定期監測這些患者的PSA恢復情況可以檢測前列腺病的復發，但術后幾年內生化復發可能不會被發現。 5）數字化高敏ELISA芯片試劑盒，微量樣本可同時測2-4個指標；單分子級別數字ELISA微量樣本

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抗體配對篩選的成本與效率優化，抗體篩選芯片通過高密度檢測區設計與微量樣本技術，大幅降低抗體開發的時間與物料成本。傳統方法中，49種抗體配對需多次實驗，耗時數天且消耗數百微升樣本；而芯片技術*需1小時、5μl樣本即可完成初步篩選，成本降低70%以上。其單通道多指標并行檢測能力，支持不同反應條件（如pH、溫度）的同步測試，快速篩選出比較好配對組合。在**標志物抗體開發中，該芯片可同時評估親和力、特異性與交叉反應性，加速診斷試劑盒的研發進程，尤其適合初創企業與科研機構的高效篩選需求，推動抗體工程從試錯性實驗向精細化篩選轉型。醫療檢測用數字ELISA快速檢測