DMEM，即 Dulbecco 改良的 Eagle 培養基，在細胞培養領域占據著極為重要的地位。它源于經典的 Eagle 培養基，經科學家 Dulbecco 改良優化后，煥發出全新活力。DMEM 培養基成分豐富，氨基酸濃度是原始 Eagle 培養基的兩倍，還涵蓋了非必需氨基酸，為細胞蛋白質合成筑牢根基。其維生素含量亦是 Eagle 培養基的四倍之多，積極參與細胞內各類代謝反應，助力細胞維持正常生理功能。同時，培養基中包含酸，這一糖酵解途徑的關鍵物質，在細胞能量供應方面發揮著重要作用，時刻為細胞的生命活動提供動力支持。Eagle培養基是一種基本、適用范圍廣的培養基，是動物細胞培養中常用的培養基之一。吉林醫療細胞培養基供應商家

    Dulbecco’s改良培養基–DMEM（Dulbecco’sModifiedEagleMedium）是在MEM培養基的基礎上研制的，與MEM培養基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素的含量增加了4倍，同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養基初設計葡萄糖含量為1000mg/L（低糖型），后來又發展出葡萄糖含量為4500mg/L（高糖型），現已廣泛應用于各種細胞的培養。HEPES是一種優良的生物緩沖劑，對細胞無毒性作用，添加HEPES的培養基能夠較長時間保持恒定的PH范圍，可以有效的防止培養液PH波動較大對細胞生長產生不利的影響。可用于無CO2培養箱。酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑，用以持續監測培養液的酸堿度，在低PH值時酚紅使培養液呈黃色，而較高的PH值時使培養液呈紫色，PH值～，適合細胞培養。但酚紅也有一些缺點，研究表明酚紅可以模擬固醇類***（特別是雌***）的作用，因此在用到雌***敏感的細胞時（如乳腺組織），較好使用不含酚紅的培養基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外，一些無血清培養基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。 湖北華晨陽細胞培養基檢測添加HEPES的培養基能較長時間保持恒定的PH范圍，可有效的防止培養液PH波動較大對細胞生長產生不利的影響。

    1.細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史，細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細胞滲透壓平衡，保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份，參與細胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養；后者緩沖能力較強，適合于5%CO2的培養條件。天然培養基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基，如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優點是營養成分豐富，培養效果良好，但缺點是成分復雜，來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前使用的天然培養基是血清，另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解的產物。

    含豐富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成（采用平衡鹽溶液溶解）與合成培養基（如MEM細胞培養基）以1:1的比例混合使用。目前用于細胞培養的血清主要是牛血清，培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的，但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。此外，血清含一些對細胞產生毒性的物質，如多胺氧化酶，能與來自高度繁殖細胞的多胺反應（如精胺、亞精胺）形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體等都會影響細胞生長，甚至造成細胞死亡。目前，血清多作為一種添加成分與合成培養基混合使用，使用濃度一般為5~20%，常用是10%。由于水解乳蛋白和血清成份復雜，批間差異大及存在病毒等外源污染風險，對下游生物制品的分離純化和安全性都存在較大的影響，在生物制藥行業的使用也越來越少。因此，基于對血漿成份的分析，合成細胞培養基應運而生。合成培養基是根據天然培養基的成分，用化學物質模擬合成、人工設計、配制的培養基。開發的基礎培養基（minimalessentialmedium,MEM）。RPMI 1640 培養基含有生物素、 維生素 B12 以及 PABA，這些成分是 Eagle’s MEM 和DMEM所不具備的。

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養中所必要的一種營養，但其在溶液中不安定，會自發降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對細胞危害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定，不會自發的降解。細胞運用其機制是：在細胞培訓時，細胞會日益向培養液中獲釋一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細胞會將這兩種水解產物吸收運用。細胞運用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養方針相像，連續的將低濃度水準的L-谷氨酰胺加入到培養液中，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不會生成剩余的氨，更有利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨?？梢匀《饶柕腖-谷氨酰胺，適用于所有的細胞，幾乎無須適應，并且可以延長細胞的培養時間，縮減傳代次數，即節約了時間也節省了錢財。與添加L-谷氨酰胺的培養基中培訓的細胞相比之下，活性減低得更慢。延滯期稍為延長的緣故是肽酶的釋放和二肽的消化需一定的時間。NEAA（非須要氨基酸），是在MEM培養基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能下降細胞培育時細胞自身生產非須要氨基酸的副作用，有效性推動細胞增殖代謝。葡萄糖可以根據研究需。MEM培養基（Minimum Essential Medium）也稱比較低必需培養基、小基本培養基或低限量Eagle培養基。湖北華晨陽細胞培養基生產產家

M199特別適用于非轉化細胞的培養，也常用于病毒學、以及大鼠胰腺上皮細胞和小鼠晶狀體組織的培養。吉林醫療細胞培養基供應商家

    細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史，細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細胞滲透壓平衡，保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份，參與細胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養；后者緩沖能力較強，適合于5%CO2的培養條件。表1-1幾種常用的BSS配方。吉林醫療細胞培養基供應商家

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