培養基制備儀:培養基的種類繁多,但制備的方法大同小異,一般可分為6個步驟:用水、稱量、溶解復水、滅菌、pH測定、保存。1、必須選用專門純凈水或者經消毒過后的無菌水。2、培養基進行復水的容器不得用銅鍋或鐵鍋,放置離子混入培養基中,影響微生物的生長。3、容器的體積須大于復水后培養基總體積的2倍,預防出現溢出情況。4、在對培養基進行加熱時,若培養基內含有瓊脂粉成分,則需要將其充分浸泡一段時間。加熱的過程中不斷進行攪拌防止出現培養基結底炭化從而造成成分損害。部分培養基則需要使用沸水進行加熱,預防發生局部燒焦及沸騰溢出。5、瓊脂類培養基進行再融化時應使用沸水浴或流動蒸汽進行加熱,較多只能加熱兩次,第二次再融化后仍未用完的培養基應棄去。6、而當對培養基實施滅菌時,需嚴格按照說明規范操作。但是也不能盲目按照說明的時間進行,需結合實際情況,合理調節滅菌時間,防止出現培養基滅菌過度而造成的成分變性。
對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在3~6℃的冰箱內!河北培養基制備儀哪個品牌好
培養基防止污染應該注意以下事項:確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、病菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中,可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養,48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證,確保滅菌和除菌效果;前者應在投產前及其后的每6個月進行驗證,后者應在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應在除菌后進行一次)。另外,應將有毒區與無毒區嚴格分開,并有各自自立的空氣凈化系統及孵室,有毒區對無毒區應保持相對負壓,防止病毒對培養細胞(尤其是細胞庫)的污染.內蒙古培養基制備儀廠家培養基制備儀支持多種配方存儲,方便調用。
培養基的安全分裝:無菌補料:通過分裝口可以定量添加無菌添加劑。大尺寸的分裝口帶有安全鎖。通過使用一個瓶子將添加劑添加到分裝開口或通過一個septum膜,使用注射器將添加劑加入,確保了添加劑的無菌添加。無菌分裝:培養基制備器的分裝口可以在分裝的時候打開,用于無菌分裝培養基。硅膠管是使用分裝接頭連接到分裝口。為了確保培養基的無菌分裝,硅膠管和分裝接頭必須提前在滅菌器中滅菌。培養基可以通過集成的空壓機產生的無菌空氣壓力分裝或通過連接到常見的蠕動泵或其他集成成泵的裝置,來進行培養基的分裝。分裝選項:制備和滅菌過的培養基可以通過一個軟管進行分裝。在每次滅菌進程中,內吸管和分裝口也通過進入的蒸汽進行了滅菌。分裝軟管和連接到該軟管的分裝接頭必須使用合適的蒸汽滅菌工藝預先滅菌,并且必須在無菌條件下連接到分裝口。
培養基的配制:1、配料:在容器中加入少量水,按照配方稱取各種藥品,加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。2、溶解:淀粉溶解:少量冷水調成糊狀,加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。3、調PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養基調節到所要求的值。4、過濾:濾紙或棉花進行過濾。5、分裝:一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。(1)三角瓶:若作靜置培養,則100ml培養基/250ml的三角瓶,較多不能超過150ml培養基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15-20ml培養基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。(2)試管分裝:液體培養基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度。固體斜面培養基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。6、包扎:分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。7、滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養成分會被破壞,培養基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。
模塊化設計便于后期升級和維護。
培養基的儲存:干粉培養基應保存在陰涼干燥處,培養基要避免陽光直射;未開瓶的培養基在室溫下的保存期限以廠家提供為準,培養基開瓶后的干粉培養基易吸濕,應注意防潮并盡快用完。應定期對儲存中的培養基進行常規檢查,如容器密閉性復查、一次開封日期、內容物的感官檢查,如果培養基發生結塊、顏色異常和其他變質跡象就不能再使用。培養基,是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養物質組合配制而成的營養基質.
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培養基的使用:1.瓊脂培養基的融化:將培養基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經過高壓滅菌的培養基盡量減少重新加熱的時間,避免過度加熱。培養基融化后立即移開,室溫靜置片刻(約2min),以免玻璃容器發生破裂。融化后的培養基放入47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫,冷卻到47℃~50℃所需的時間取決于培養基的類型、體積和在水鍋里的分裝量。融化后內培養基應盡快使用,放置時間一般不超過4h。剩余的培養基固后不得再次融化使用。特別是靈敏性培養基,應根據相關標準,縮短融化后放置的時間。
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