報告基因選用GFP或RFP，**小啟動子來自斑馬魚gata2基因；將上述載體與體外轉錄得到的Tol2轉座酶的mRNA共同注射到斑馬魚的單細胞受精卵中，受精卵長大后成為founder；Founder外交（out-cross）得到F1代胚胎，從中挑選出對于報告基因具有組織特異性表達模式的胚胎，拍照記錄后分類培養(yǎng)；F1長大后通過linker-mediatedPCR的方法鑒定對應于GFP（或RFP）表達圖式的Tol2插入位點，并通過與已知基因組數據比較，對插入位點進行定位與分析；通過外交純化得到轉基因魚，直至得到只含有單個插入品系的轉基因魚。斑馬魚實驗提高藥物研發(fā)效率。湖南斑馬魚實驗動物模型

斑馬魚基因敲除品系制備服務簡介1.基因敲除(GeneKnockout)根據給定GeneID或Genename，分析基因保守結構域，在保守結構域或客戶指定區(qū)域設計靶點并制備靶點gRNA，gRNA和Cas9共注射使基因產生移碼突變，通過PCR篩選得到穩(wěn)定遺傳品系。2.基因敲除技術特點2.1通過將基因敲除斑馬魚品系與野生型相比較，研究者可以揭示特定基因的功能。2.2在基因組水平上將目標基因敲除，遺傳背景干凈清晰，是研究基因功能的金標準。服務流程▲根據客戶提供的GeneID或Genename進行基因分析——▲cas9mRNA和多個gRNA靶點的設計及合成——▲高效gRNA靶點的篩選及效率驗證——▲F0代斑馬魚的可遺傳性篩選——▲雜合子F1代斑馬魚的基因型鑒定環(huán)特生物優(yōu)勢成熟的基因敲除技術快速獲得穩(wěn)定品系；多靶點共注射F0代驗證基因功能。陜西斑馬魚實驗的可靠性使用斑馬魚實驗數據申報 CFDA 臨床試驗。

斑馬魚是功能基因組是科學研究中比較重要的模式生物之一，已經推動了遺傳學、發(fā)育生物學、分子細胞生物學、神經科學和疾病研究等多個領域的研究與應用發(fā)展。斑馬魚具有胚胎透明、體外發(fā)育等特點，在受精后48小時內基本形成，所有發(fā)育階段的胚胎均可在顯微鏡下操作和觀測，不但可以直接觀察和追蹤基因和細胞在發(fā)育中的行為，而且易于在整體動物模型中研究其調控機制。斑馬魚個體小，易于低成本地在實驗室大量養(yǎng)殖，遺傳學和胚胎學操作比小鼠等哺乳動物模型更易于掌握，適合多種疾病模型的建立。另外，斑馬魚胚胎產量高，可以用高通量方法篩選與基因和細胞功能相關的小分子化合物。

身體透明，斑馬魚在發(fā)育的前7天身體透明，可直接觀察內部***。結合***染料、抗體、核酸探針等方法能夠觀察自由活動的或者固定后的斑馬魚***樣本，這種直接的觀察為自動化藥物篩選和藥物靶***鑒別奠定了堅實有利的基礎。斑馬魚和人類的疾病信號轉導通路高度保守。斑馬魚體內存在的人類同源基因比例高達87%，某些疾病相關基因與人類基因保守性高達99%,這意味著在其身上做藥物實驗所得到的結果在多數情況下也適用于人體。在已知生物中，魚類是**早具備獲得性免疫系統(tǒng)的綱。這就使得對斑馬魚免疫系統(tǒng)的研究成為人們了解非特異性免疫系統(tǒng)和獲得性免疫系統(tǒng)進化與功能相互關系的重要工具。這個獨特的免疫系統(tǒng)進化地位還賦予了斑馬魚作為免疫學研究模式生物的另一重要優(yōu)勢，即其成體可以在沒有胸腺、淋巴細胞生成的情況下存活傳代。斑馬魚實驗的常見問題。

成功除了努力還需要借助科學的方法和先進的工具。斑馬魚模型的獨特優(yōu)勢使其能夠對現有的有體外實驗和哺乳動物組成的傳統(tǒng)藥物研發(fā)模式，斑馬魚既可以作為體外實驗和哺乳動物實驗之間的橋梁，在早期淘汰大量成***不佳的候選化合物，減少哺乳動物實驗階段的時間和費用成本。同時，一些靠現有方法很難解決的藥效和安全性評價模型可以通過斑馬魚來解決，打破實驗技術方面的瓶頸和束縛；另外，利用斑馬魚模型，我們可以在一些特定靶向藥物的開發(fā)上采用新的研發(fā)模式，從斑馬魚篩選開始，將活性與安全性較好候選化合物篩選出來后，同時開展體外機制研究和哺乳動物體內實驗，通過這種模式，可以大幅縮短早期研發(fā)周期、節(jié)省研發(fā)成本、提高藥物發(fā)現的成功率。化學品斑馬魚胚胎和卵黃囊仔魚階段的短期毒性試。海南北大關于斑馬魚實驗

斑馬魚模型和技術研究。湖南斑馬魚實驗動物模型

保持首先，斑馬魚非常強壯，易于維護。由于它們是在池塘中自然發(fā)現的，它們的理想條件可以很容易地復制。他們也很便宜；然而，它們確實需要比其他模型生物如蒼蠅更多的空間。這種模式也是脊椎動物，這使它優(yōu)于其他模式。生殖斑馬魚的繁殖力非常高，每周產數百個卵。他們也有很短的生成時間，這意味著科學家有一個永無止境的供應這種模式。這縮短了整個實驗過程，并且在突變體生產中特別有用。另一個優(yōu)點是斑馬魚卵是從外部發(fā)育的，科學家可以很容易地研究它們**初的發(fā)育過程。這是一個優(yōu)于其他模型，如小鼠，發(fā)展內部，因此阻礙視覺調查。湖南斑馬魚實驗動物模型