本研究中使用的hPL是Stemulate公司兩款人源血小板裂解液(NH和H)是在工業(yè)規(guī)模(很小批量為20L)生產(chǎn)的,具備高度的批間一致性。將脂肪來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞在DME/F-12中添加10%Stemulate-NH或10%FBS進(jìn)行傳代培養(yǎng)11代。在DME/F-12中分別添加5、7.5或10%Stemulate-NH,并與10%胎牛血清進(jìn)行比較。羊膜來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞也在2.5或5%Stemulate中培養(yǎng),與10%胎牛血清相比。牙髓來(lái)源的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在DME/F-12中添加不同濃度的Stemulate-NH或Stemulate-H,并與添加10%FBS的培養(yǎng)基進(jìn)行比較。在所有實(shí)驗(yàn)中,每天都監(jiān)測(cè)細(xì)胞,每次傳代結(jié)束時(shí),收獲細(xì)胞,并使用臺(tái)盼藍(lán)和一個(gè)自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)然后繼續(xù)傳代。更多關(guān)于Sexton的相關(guān)產(chǎn)品歡迎咨詢上海曼博生物!血小板裂解液的血源從哪里采集?Sigma血小板裂解液使用說(shuō)明
間充質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞(MSCs)體外擴(kuò)增的培養(yǎng)基一般添加胎牛血清FBS,但是考慮到異種ganran及免疫反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn),監(jiān)管機(jī)構(gòu)并不鼓勵(lì)使用。人血小板裂解液除了不存在異種免疫反應(yīng)或牛病原體ganran的風(fēng)險(xiǎn),有助于增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞的擴(kuò)增,也相對(duì)容易地根據(jù)良好的生產(chǎn)規(guī)范程序生產(chǎn),并已用于臨床應(yīng)用,因此現(xiàn)如很多資料顯示血小板裂解液已被證明是擴(kuò)增MSCs一種非常有效的FBS替代方法(參考文獻(xiàn)1)。血小板裂解液由血漿組成,含有纖維蛋白原和凝血因子,對(duì)于一般細(xì)胞培養(yǎng)中涉及的含鈣培養(yǎng)基來(lái)說(shuō)通常需要加入抗凝劑(常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等)來(lái)防止凝膠形成,其中肝素很為常用。更多關(guān)于Sexton人血小板裂解液的相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!福建三一造血血小板裂解液添加肝素的目的血小板裂解液制備方法是什么?
為了排除肝素對(duì)于細(xì)胞增長(zhǎng)的抑制作用可能與防腐劑(這里采用芐醇作為防腐劑添加到UFH或LMWH中)有關(guān)。我們對(duì)不添加防腐劑的肝素進(jìn)行了相同實(shí)驗(yàn),結(jié)果對(duì)AT-MSC和BM-MSC細(xì)胞增殖抑制趨勢(shì)相同。在隨后的傳代培養(yǎng)到3代中的累積的群體中,兩種肝素UFH和LMWH對(duì)MSC增殖的影響也變得明顯,血小板裂解液中肝素濃度較低時(shí)累積細(xì)胞群體倍增指數(shù)(cPD) 較高。CFU-F的塑料粘附生長(zhǎng)性能是MSCs培養(yǎng)的先決條件,在96孔板中通過(guò)有限稀釋的方法結(jié)合泊松統(tǒng)計(jì)進(jìn)行CFU-F試驗(yàn),顯示集落形成率CFU-F在高濃度UFH時(shí)中度降低,而在高濃度Enoxaparin(LMWH)時(shí)明顯降低。這些結(jié)果表明高濃度的LMWH減少了CFU-F的形成,這與已報(bào)道的其他研究結(jié)論一致。
在已有的上百篇文獻(xiàn)中,報(bào)道了Sexton公司的Stemulate和nliven已經(jīng)被確定為間充質(zhì)干細(xì)胞MSC的良好生長(zhǎng)補(bǔ)充劑,并且支持各種組織來(lái)源包括脂肪、骨髓、軟骨、牙髓和臍帶中的MSCs的擴(kuò)增培養(yǎng)。Sexton公司標(biāo)準(zhǔn)型和PR處理的血小板裂解液始終優(yōu)于輻照胎牛血清,幫助用戶優(yōu)化MSCs的生產(chǎn)。用戶通過(guò)使用Sexton公司的血小板裂解液培養(yǎng)基生長(zhǎng)劑,降低時(shí)間和花費(fèi)的成本,可帶來(lái)更快的倍增時(shí)間,既可以減少潔凈室生產(chǎn)時(shí)間,也可以減少試劑的使用量,實(shí)現(xiàn)總成本的降低。更多關(guān)于人血小板裂解液/血清替代相關(guān)產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio血小板裂解液里有哪些生長(zhǎng)因子?
細(xì)胞zhi liao的生產(chǎn)是一項(xiàng)費(fèi)時(shí)又昂貴的工程。優(yōu)化生產(chǎn)工藝通常會(huì)涉及優(yōu)化培養(yǎng)參數(shù)去減少時(shí)間、降低成本,同時(shí)提供呈現(xiàn)預(yù)期療效的表型。細(xì)胞增長(zhǎng)所需的培養(yǎng)基補(bǔ)充劑也是整個(gè)細(xì)胞生產(chǎn)工藝中的一個(gè)較關(guān)鍵的因素。胎牛血清(FBS)一直以來(lái)被作為是細(xì)胞培養(yǎng)的常用補(bǔ)充劑,但因涉及倫理和安全問(wèn)題,如今從加工過(guò)的血液中提取的人源培養(yǎng)基補(bǔ)充劑已經(jīng)得到越來(lái)越多的使用。血小板因其在血栓形成中的作用而聞名,很近,血小板被認(rèn)為是傷口部位再生過(guò)程的關(guān)鍵介質(zhì)。血小板裂解過(guò)程中釋放的生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子可調(diào)節(jié)局部免疫應(yīng)答,并啟動(dòng)局部組織的加速恢復(fù)(圖1)。考慮到血小板在人類生物學(xué)中這些作用,也就不難理解為什么處理過(guò)的血小板裂解液能夠給細(xì)胞培養(yǎng)基提供可靠的促生長(zhǎng)特性了。更多關(guān)于人血小板裂解液/血清替代相關(guān)產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio血小板裂解液怎么復(fù)蘇?臨床用血小板裂解液保存溫度
哪家公司可以進(jìn)口血小板裂解液?Sigma血小板裂解液使用說(shuō)明
血小板裂解液是一種在血液樣本中提取血小板后,通過(guò)特定的裂解方法得到的液體。根據(jù)不同的裂解條件,血小板裂解液可以分為不同的類型,每種類型具有特定的用途和優(yōu)勢(shì)。本文將介紹血小板裂解液的分類方法和分類結(jié)果,并闡述其在血小板計(jì)數(shù)和血液流變學(xué)研究等方面的應(yīng)用。血小板裂解液的分類方法主要包括根據(jù)裂解時(shí)間、溫度、介質(zhì)等進(jìn)行分類。根據(jù)裂解時(shí)間,血小板裂解液可分為短暫裂解液和持久裂解液。短暫裂解液是指在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行裂解,得到清澈透明的液體,其中包含血小板碎片和溶解的血小板成分。持久裂解液是指在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)進(jìn)行裂解,得到含有更多血小板碎片和溶解成分的液體。更多關(guān)于血小板裂解液的相關(guān)產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!Sigma血小板裂解液使用說(shuō)明