細(xì)胞培養(yǎng)基制備1.比較好在4°C下解凍ELAREMPrime血小板裂解液過(guò)夜或在37°C水浴中解凍1小時(shí)。2.通過(guò)將10%ELAREMPrime血小板裂解液添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基(即MEMα、GlutaMAX補(bǔ)充劑、無(wú)核苷)和1%的青霉素/鏈霉素作為**終濃度來(lái)制備完整的細(xì)胞培養(yǎng)基。3.應(yīng)在完全細(xì)胞培養(yǎng)基中加入肝素以抗凝。我們建議添加肝素的**終濃度為2IU/mLPLSUPPLEMENT(貨號(hào)PL-SUP-500)or0.024mg/mLPLSUPPLEMENT-XF(貨號(hào)PL-SUP-500-XF).4.完整細(xì)胞培養(yǎng)基可在4°C下儲(chǔ)存,并穩(wěn)定約4周儲(chǔ)存和穩(wěn)定性ELAREMPrime在標(biāo)簽上注明的失效日期之前是穩(wěn)定的。ELAREMPrime在使用前在-20°C(或在-80°C進(jìn)行長(zhǎng)期儲(chǔ)存)冷凍儲(chǔ)存時(shí)穩(wěn)定。解凍后,建議將未使用的ELAREMPrime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍。應(yīng)避免ELAREMPrime的重復(fù)凍融循環(huán),因?yàn)檫@會(huì)導(dǎo)不溶性顆粒形成的增加。使用時(shí),只需預(yù)熱一份完整的細(xì)胞培養(yǎng)基,并將剩余的培養(yǎng)基冷藏在4-8°C。更多關(guān)于Sexton人血小板裂解液的相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢官方代理商上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào)查看更多技術(shù)文章:Mine-bio血小板裂解液可用于多種細(xì)胞培養(yǎng),如MSC間充質(zhì)干細(xì)胞,角質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞等。干細(xì)胞培養(yǎng)血小板裂解液如何制備
美國(guó)Sexton無(wú)動(dòng)物源人血小板裂解液hPL已被上百篇文獻(xiàn)報(bào)道了美國(guó)Sexton公司的血小板裂解液為間充質(zhì)干細(xì)胞MSCs以及CAR-T/NK細(xì)胞擴(kuò)增的良好的細(xì)胞培養(yǎng)補(bǔ)充劑,根據(jù)用戶科研和臨床以及GMP生產(chǎn)需求,提供臨床或研究級(jí)配方,同時(shí)滿足質(zhì)量和監(jiān)管要求,在FDA已經(jīng)備案藥物主文件BMF,在全球臨床干細(xì)胞和免疫tumour學(xué)應(yīng)用中用作高性能FBS替代品。上海曼博生物作為美國(guó)Sexton品牌hPL產(chǎn)品在中國(guó)的一級(jí)代理商,為細(xì)胞zhiliao企業(yè)提供國(guó)內(nèi)細(xì)胞zhiliao企業(yè)需要的長(zhǎng)期現(xiàn)貨的hPL,為臨床以及大規(guī)模商業(yè)化生產(chǎn)保駕護(hù)航。更多人血小板裂解液相關(guān)產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-Bio查看更多技術(shù)文章!MSCs培養(yǎng)血小板裂解液添加肝素的目的哪里可以買(mǎi)人AB血清?
為了排除肝素對(duì)于細(xì)胞增長(zhǎng)的抑制作用可能與防腐劑(這里采用芐醇作為防腐劑添加到UFH或LMWH中)有關(guān)。我們對(duì)不添加防腐劑的肝素進(jìn)行了相同實(shí)驗(yàn),結(jié)果對(duì)AT-MSC和BM-MSC細(xì)胞增殖抑制趨勢(shì)相同。在隨后的傳代培養(yǎng)到3代中的累積的群體中,兩種肝素UFH和LMWH對(duì)MSC增殖的影響也變得明顯,血小板裂解液中肝素濃度較低時(shí)累積細(xì)胞群體倍增指數(shù)(cPD)較高。CFU-F的塑料粘附生長(zhǎng)性能是MSCs培養(yǎng)的先決條件,在96孔板中通過(guò)有限稀釋的方法結(jié)合泊松統(tǒng)計(jì)進(jìn)行CFU-F試驗(yàn),顯示集落形成率CFU-F在高濃度UFH時(shí)中度降低,而在高濃度Enoxaparin(LMWH)時(shí)明顯降低。這些結(jié)果表明高濃度的LMWH減少了CFU-F的形成,這與已報(bào)道的其他研究結(jié)論一致。
通過(guò)BODIPY染色的脂肪滴來(lái)反映的成脂分化情況,發(fā)現(xiàn)兩種肝素UFH和LMWH在高濃度時(shí),分化成脂細(xì)胞的百分比明顯降低。同樣的,通過(guò)茜素紅染色的磷酸鈣沉淀分析成骨分化情況,高濃度肝素也降低了成骨分化的百分比,特別是在脂肪組織來(lái)源的MSCs中,UFH肝素高濃度對(duì)成脂和成骨分化誘導(dǎo)的負(fù)面影響較為明顯?;谏鲜鼋Y(jié)果,我們現(xiàn)在知道血小板裂解液中添加的抗凝劑肝素在體外MSCs擴(kuò)增的必要性,在購(gòu)買(mǎi)血小板裂解液后,用戶應(yīng)結(jié)合自己的實(shí)驗(yàn)條件去合理的選擇合適的肝素濃度,而肝素濃度的選擇應(yīng)該在有效防止含血小板裂解液培養(yǎng)基凝膠形成的基礎(chǔ)上盡量降低,以減少肝素對(duì)于MSCs的增殖能力、成纖維細(xì)胞體外集落形成單位(CFU-F)、MSCs體外分化等的影響。更多關(guān)于Sexton血小板裂解液相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!哪個(gè)品牌的血小板裂解液質(zhì)量好?
經(jīng)常有客戶會(huì)問(wèn)道人血小板裂解液中的肝素的使用濃度到底如何抉擇呢?添加培養(yǎng)之前有必要花時(shí)間來(lái)優(yōu)化下這個(gè)肝素濃度參數(shù)嗎?現(xiàn)在小編通過(guò)比較了不同濃度的普通肝素(unfractionatedheparinUFH,分子量3000-30000Da)和低分子肝素(LMWH-分子量2000-12000Da)在hPL培養(yǎng)基中培養(yǎng)MSCs的增殖能力、成纖維細(xì)胞體外集落形成單位(colony-formingunit,CFU-F)、免疫表型和體外分化等情況,給大家作解答。從而幫助大家正確使用血小板裂解液。更多關(guān)于Sexton人血小板裂解液的相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!
人源血小板裂解物是一種能有效支持間充質(zhì)干細(xì)胞等人類細(xì)胞生長(zhǎng)的高效細(xì)胞培養(yǎng)補(bǔ)充劑。無(wú)沉淀血小板裂解液常見(jiàn)問(wèn)題
血清替代物里有哪些有效成分?干細(xì)胞培養(yǎng)血小板裂解液如何制備
細(xì)胞培養(yǎng)基制備1.比較好在4°C下解凍ELAREM Prime血小板裂解液過(guò)夜或在37°C水浴中解凍1小時(shí)。2.通過(guò)將10%ELAREM Prime血小板裂解液添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基(即MEMα、GlutaMAX補(bǔ)充劑、無(wú)核苷)和1%的青霉素/鏈霉素作為**終濃度來(lái)制備完整的細(xì)胞培養(yǎng)基。3.應(yīng)在完全細(xì)胞培養(yǎng)基中加入肝素以抗凝。我們建議添加肝素的**終濃度為2IU/mL PL SUPPLEMENT(貨號(hào)PL-SUP-500)or 0.024mg/mL PL SUPPLEMENT-XF(貨號(hào)PL-SUP-500-XF).4.完整細(xì)胞培養(yǎng)基可在4°C下儲(chǔ)存,并穩(wěn)定約4周儲(chǔ)存和穩(wěn)定性ELAREM Prime在標(biāo)簽上注明的失效日期之前是穩(wěn)定的。ELAREM Prime在使用前在-20°C(或在-80°C進(jìn)行長(zhǎng)期儲(chǔ)存)冷凍儲(chǔ)存時(shí)穩(wěn)定。解凍后,建議將未使用的ELAREM Prime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍。應(yīng)避免ELAREM Prime的重復(fù)凍融循環(huán),因?yàn)檫@會(huì)導(dǎo)不溶性顆粒形成的增加。使用時(shí),只需預(yù)熱一份完整的細(xì)胞培養(yǎng)基,并將剩余的培養(yǎng)基冷藏在4-8°C。干細(xì)胞培養(yǎng)血小板裂解液如何制備