免疫組化結(jié)果要如何分析?
(1)陽(yáng)性著色細(xì)胞計(jì)數(shù)法。在40*光鏡下,隨機(jī)選擇不重疊的10個(gè)視野,機(jī)器或人工計(jì)數(shù)陽(yáng)性著色細(xì)胞,每組3~6張不同動(dòng)物組織切片,然后進(jìn)行組間比較即可。
(2)灰密度分析法。可以通過(guò)在不同組別和不同動(dòng)物組織切片上選擇相同區(qū)域、相同條件下用image j進(jìn)行灰密度分析,然后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析即可。
(3)評(píng)分法。用光學(xué)顯微鏡下對(duì)組織切片分別按染色程度(0~3分為陰性著色、淡黃色、淺褐色、深褐色)、陽(yáng)性范圍進(jìn)行評(píng)分(1~4分為0~25%、26~50%、51~75%、76~100%),**終可以分?jǐn)?shù)相加,再進(jìn)行比較。對(duì)于以上這幾種方法,各有利弊,請(qǐng)細(xì)心選擇。要想得到正確結(jié)果的前提是你要做出著色均勻、背景很淺的高質(zhì)量切片。
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免疫組化有哪幾種分類(lèi) ?
1)按標(biāo)記物質(zhì)的種類(lèi),如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過(guò)氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、免疫酶標(biāo)法和免疫金銀法等。
2)按染色步驟可分為直接法(又稱(chēng)一步法)和間接法(二步、三步或多步法)。與直接法相比,間接法的靈敏度提高了許多。
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3)按結(jié)合方式可分為抗原-抗體結(jié)合,如過(guò)氧化物酶-抗過(guò)氧化物酶(***)法;親和連接,如卵白素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物(ABC)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連結(jié)(SP)法等,其中SP法是比較常用的方法;聚合物鏈接,如即用型二步法,此方法尤其適合于內(nèi)源性生物素含量高的組織抗原檢測(cè)。 河北什么是免疫組化可以做什么有沒(méi)有能做免疫組化的實(shí)驗(yàn)外包公司?效果好一點(diǎn)的。
免疫組化中IHC vs ICC的區(qū)別。英瀚斯生物為您說(shuō)明。除了生物學(xué)來(lái)源,IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同。ICC需要透化,要么通過(guò)固定過(guò)程,要么是單獨(dú)的透化步驟,這樣抗體才能與細(xì)胞內(nèi)的靶點(diǎn)相結(jié)合。而IHC可能不要單獨(dú)的透化步驟,這取決于切片的厚度和固定方法。包埋在石蠟中的IHC切片必須進(jìn)一步處理,才能進(jìn)行抗體染色。一旦處理好樣品,IHC和ICC的染色操作就幾乎沒(méi)什么差異了。當(dāng)然,就染色而言,根據(jù)所使用的抗體來(lái)優(yōu)化還是少不了的。
免疫組化的應(yīng)用領(lǐng)域
免疫組化在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中有著廣泛的應(yīng)用。在**學(xué)中,免疫組化通常被用于**標(biāo)志物的檢測(cè),幫助確定**的類(lèi)型、分級(jí)和預(yù)后。例如,免疫組化通過(guò)檢測(cè)ER、PR和HER2的表達(dá),可以指導(dǎo)乳腺*的治療方案。在神經(jīng)科學(xué)中,免疫組化用于研究神經(jīng)元的分布和功能。在免疫學(xué)中,免疫組化可以用于檢測(cè)炎癥細(xì)胞和免疫細(xì)胞在組織中的分布和水平。此外,免疫組化實(shí)驗(yàn)技術(shù)還被廣泛應(yīng)用于發(fā)育生物學(xué)、病理學(xué)和藥物研發(fā)等領(lǐng)域。 在南京英瀚斯做的免疫組化,效果不錯(cuò)!
免疫組化的結(jié)果分析:
免疫組化實(shí)驗(yàn)通常需要設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照(或替代對(duì)照)(陽(yáng)性對(duì)照是排除方法和實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有無(wú)問(wèn)題;陰性對(duì)照與替代對(duì)照是排除有無(wú)非特異性染色)。一般情況下,陽(yáng)性對(duì)照顏色的特點(diǎn)為:Ag定位,包漿、胞核、胞膜、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性。且染色的強(qiáng)度不同(顏色深淺不一);陰性對(duì)照的特點(diǎn)為:染色細(xì)胞與組織無(wú)區(qū)別,顏色具有彌散性,分布均勻。
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說(shuō)明:免疫組化實(shí)驗(yàn)可以對(duì)結(jié)果進(jìn)行定量分析,但要實(shí)驗(yàn)得到的必須是高質(zhì)量的染色切片,要求背景染色淺且特異性染色較深,這樣分析的結(jié)果才會(huì)比較準(zhǔn)確。 哪里可以做免疫組化?黑龍江做得好的免疫組化可以做什么
病理免疫組化多少錢(qián)?河北什么是免疫組化注意事項(xiàng)
細(xì)胞屬性的判定,免疫組化也可以進(jìn)行這方面的臨床應(yīng)用。通過(guò)特定抗體標(biāo)記出細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原成分,來(lái)判定細(xì)胞的屬性,確定cancer的來(lái)源。如細(xì)胞角蛋白(CK)是上皮性標(biāo)記,CK陽(yáng)性提示cancer為上皮源性cancer;降鈣素抗體是甲狀腺髓樣cancer特有的標(biāo)記;甲狀腺球蛋白(Tg)陽(yáng)性提示是甲狀腺濾泡性cancer;前列腺特異性抗原(PSA)只見(jiàn)于前列腺上皮;膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)陽(yáng)性則提示膠質(zhì)cancer;CD20和CD79a陽(yáng)性則提示B細(xì)胞淋巴瘤;平滑肌肌動(dòng)蛋白(Actin)陽(yáng)性提示cancer為平滑肌源性;胃腸道間質(zhì)瘤中原cancer基因蛋白產(chǎn)物CD117陽(yáng)性;血管源性cancer中內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物CD34陽(yáng)性等等。如果您需要做實(shí)驗(yàn)外包,可以與我們英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系。河北什么是免疫組化注意事項(xiàng)