精子手工計數原理及操作方法1.原理：將精液用適當的稀釋液作一定量稀釋后，混勻注入計數池內計數，再算出每毫升精液中精子數。2.方法（按照***版第四版《全國臨床檢驗操作規程》）1).于小試管內加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計數板的計數池內,靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準進行計數。3.計算1).如每個**中方格內精子少于10個,應計數所有25個中方格內的精子數。2).如每個**中方格內精子在10~40個,應計10個中方格內的精子數。3).如每個**中方格內精子多于40個,應計數5個中方格內的精子數。公式：精子數=計數結果/計數中方格×25×1/計數池高度×20×103/ml=計數結果/計數中方格×1/計數池高度×5×103/mlCASA系統主要用于精子動力學的分析，可以評估精子的濃度、活力等參數。南京計算機輔助精子分析重復性高

二、生化及免疫學檢驗：1、精漿果糖測定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L。【臨床意義】（1）精液果糖為0，可見于先天性兩側輸精管及精囊腺缺如、兩側輸精管完全阻塞或逆行**。（2）精液果糖降低，常見于精囊炎和雄***分泌不足，果糖不足可導致精子運動能量缺乏，甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測定【正常參考值】金氏法：＞255nmol·s-1/L【臨床意義】（1）精漿酸性磷酸酶含量增高，常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。（2）精漿酸性磷酸酶含量降低，常見于前列腺炎患者。（3）精漿酸性磷酸酶檢測是法醫鑒定有無精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測定【正常參考值】36.72±21.43U/L。【臨床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關，其活力不足，可導致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測定【正常參考值】LDH-X***活性：2620±1340U/L；LDH-X相對活性：≥0.426。【臨床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性，是精于運動獲能的關鍵酶，該酶檢測可作為診斷男性不育有價值的指標。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失，精子發生缺陷時無LDH-X形成，少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。廣州快速運動精子分析DSL精子分析，平均角位移（MAD）?：精子頭沿其曲線軌跡瞬時轉折角度的時均J對值?。

精液檢查前有什么注意事項？一、留精液前，病人應停止**4～7天。檢查前1周不能用丙酸睪丸酮、**睪丸酮、苯丙酸諾龍。采取精液時，可用軟皂或石蠟油做**按摩，將標本收集在無菌的試管中；也可用避孕套（沖洗干凈，不含殺精子藥物）或采用**中斷法收集精液，但這樣收集的量往往不多。如用上述方法采不到精液，可經直腸內按摩精囊及輸精管末端、壓迫采尿，檢查沉渣中有無精子。不要將精液暴露在過熱和過冷的環境中。及時交給醫生備查，不得超過30分鐘。冷天要注意保暖，送檢時可放在內衣口袋里保溫。二、如果要進行細菌培養，應先沖洗、消毒尿道口，再將精液收集在無菌試管中。夫妻同居3年以上，沒有采取任何避孕措施而未能受孕的稱不孕癥。如果是不孕癥，在雙方未進行檢查前，不能盲目懷疑某一方，更不能認為不孕的原因是女方。妊娠是夫妻雙方的事。實現受孕，男方的精液含量應正常，形態和動力也應正常。女方能正常排卵，精子和卵子能結合成受精卵，這種受精卵能在子宮內膜種植。上述的幾個環節中的某一個環節發生障礙，都可引起不孕。三、如果上述檢查結果精液是正常的，女方也應去醫院檢查，包括全身情況、生殖***、卵巢排卵功能、輸卵管通暢否、免疫檢查。

美國HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析儀已經被FDA和國內外毒理學實驗室所使用。本試驗研究目的對精子分析儀和血細胞計數板在大鼠附睪精子計數結果的比較驗證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對三批次雄鼠的精子計數進行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實施安樂死后,取左側附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預熱的含有M199培養液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養液進行一定倍數的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOXIVOS精子分析儀載物臺,進行精子計數,同時吸取稀釋后的精子懸液滴入血細胞計數板內,通過光學顯微鏡進行計數,比較兩種計數方法的差異性。結果***批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數器的精子計數結果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數器的精子計數結果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數器的精子計數結果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個批次的精子分析儀和血細胞計數板的精子計數結果無統計學差異(P>0.05)。結論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學研究中具有重要的應用價值。精子分析儀節省時間，提高實驗室的工作效率，讓醫生和科研人員更快速地獲取實驗分析結果。

精子分析儀使用方法儀器的使用方法因型號、廠家差異不盡相同，操作人員上崗前必須經過嚴格培訓，了解工作原理、操作規程、校正方法等，使用前必須仔細閱讀說明書。一般儀器都會經歷如下操作步驟[1]：開機接通電源，打開計算機輔助**分析系統。1.輸入患者信息及**理學檢查結果。2.加樣取液化的**1滴，滴入精子計數板的計數池中，置顯微鏡操作平臺上，點擊“活動顯示”菜單，調節好顯微鏡焦距，顯示器上即可顯示待測標本的精子運動圖像。3.分析點擊“計算分析”菜單，系統進入自動分析狀態，圖像顯示區出現精子分割圖像并進行分析。4.打印報告分析結束后，可根據需要打印出分析結果。Hamilton Thorne自動精子分析儀具有高精度、高效率和自動化的優點。美國狗精子分析WOB

精子分析儀參數，平均路徑速率（VAP）?：精子頭沿其平均路徑移動時的時均速率。南京計算機輔助精子分析重復性高

測定精子密度和精子總數的方法主要包括顯微鏡計數和全自動分析。1.顯微鏡計數：這是傳統的測定方法，需要收集精液，通常是使用量杯。收集后，應在實驗室中盡快進行計數。應在光學顯微鏡下將精子進行分類，這一步非常重要，因為完整的精子才能被計數。然后，將剩余的精液樣本通過自然沉降或離心的方法讓精子下沉，通過顯微鏡觀察并計數。這種方法需要一定的經驗和技巧，而且受到許多因素的影響，如精子的活動性、濃度、形態等。2.全自動分析：隨著科技的發展，現在有全自動的精子分析儀，可以快速準確地測定精子密度和總數。這種方法通過激光技術進行，可以測量大量精子，包括前向運動的精子。這些儀器通常可以提供更精確的結果，并且減少了人為錯誤。在進行精子計數前，男性應避免長時間禁欲，因為這可能會影響精子的數量和質量。同時，健康的飲食和生活方式也有助于提高精子的數量和質量。南京計算機輔助精子分析重復性高