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來源: 發布時間:2024-01-05

血清培養基主要問題:血清的成份可能有幾百種之多,對其準確的成份、含量及其作用機制不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、和脂類等尚未充分認識,這給研究工作帶來許多困難。血清都是批量生產,各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標準化和連續性受到限制。對大多數細胞,在體內狀態,血清不是它們接觸的生理學液體,只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細胞在體內的正常狀態,血清可能促進某些細胞的生長(成纖維細胞)同時抑制另一類細胞生長(表皮細胞)。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性。湖南培養基消毒 培養基制備器

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培養基的物理滅菌方法:(一)加熱滅菌法:加熱可破壞微生物中酶、蛋白質和核酸,導致微生物死亡。加熱滅菌又分干熱滅菌法和濕熱滅菌法。在同一溫度下,濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好。主要是因濕熱滅菌時,有水分存在,蛋白質容易變性。水分又易使微生物膜壁潤濕,濕熱的穿透力比干熱大。常用的有火焰滅菌法與干熱空氣滅菌法兩種。(二)紫外線滅菌法:是指用紫外線照射殺滅微生物的方法。一般用于滅菌的紫外線波長是200~300nm,滅菌力較強的波長是253.7nm。紫外線作用于核酸蛋白促使其變性,同時空氣受紫外線照射后產生微量臭氧,從而起共同殺菌作用。紫外線進行直線傳播,可被不同的表面反射,穿透力微弱,但較易穿透清潔空氣及純凈的水。湖南培養基消毒 培養基制備器強力磁力攪拌培養基在內腔里混合的均勻性得到確保,并避免凝結。

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培養基的配置應該注意的幾大步驟:常用玻璃儀器的準備制備培養基所用的吸管、錐形瓶、毛細吸管、平皿等玻璃儀器用前要用肥皂水洗刷后用清水沖洗干凈,晾干后備用。(1)平皿用紙或布包好,或裝在金屬盒內,于121℃高壓蒸汽菌3min后烘干,備用。(2)試管管口用棉花塞或硅氟塑料試管塞塞好,再用布或報紙包扎好,121℃高壓蒸汽滅菌20℃后烘干,備用。(3)吸管及滴管先用少許棉花塞于吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽內的氣體污染),然后用紙包后或裝入金屬吸管筒內,于121℃高壓蒸汽滅菌20min后烘干,備用。其他玻璃器皿均應按上法處理,也應裝金屬筒內160℃干熱滅菌2h后,備用。

培養基的實驗室制備:①概述:培養基和試劑的滅菌通常采用濕熱滅菌或過濾滅菌。有些培養基無需高壓滅菌,可煮滅菌。如,含亮綠的腸道菌培養基對光和熱特別敏感,應在煮沸后快速冷卻,避光保存。同樣,一些試劑則不需要滅菌,直接使用(參見相關標準或生產廠商的使用說明)。②濕熱滅菌;p濕熱滅菌在高壓鍋或培養基制備器中進行。高壓霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培養基的體積超過1000mL,要對滅菌條件進行適當的調整。所有操作均要按照標準和使用說明的規定進行。注:大容量培養基(>1000mL)滅菌時可能會造成過度加熱。加熱后應采取適當的方式冷卻,防止沸溢。這對大容量培養基和敏感性培養基(如含亮綠的培養基)是非常重要的。培養基是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料。

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高壓滅菌造成培養基結焦焦化問題:在實驗過程中,檢測人員發現在高壓滅菌后的培養基有結焦焦化現象。微生物認為造成這種現象是:控制培養基在容器中不要超過百分之八十,避免填充過多。注意控制高壓滅菌時間過長(115-116度)二十分鐘即可,溫度不超過121度,而且滅菌后的培養基在高溫環境中不要長時間存放。以上原因都會導致培養基結焦焦化。貯存:培養基在30℃下放置1天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。固體培養基根據性質又分為固化培養基、非可逆性固化培養基、天然固態培養基、濾膜。山西培養基消毒 培養基制備器

培養基的不正確制備會導致培養基出現質量問題。湖南培養基消毒 培養基制備器

孢子培養基:孢子培養基是供菌種繁殖孢子的一種常用固體培養基,對這種培養基的要求是能使菌體迅速生長,產生較多較好的孢子,并要求這種培養基不易引起菌種發生變異。所以對孢子培養基的基本配制要求是:靠前,營養不要太豐富(特別是有機氮源),否則不易產孢子。如灰色鏈霉在葡萄糖-硝酸鹽-其它鹽類的培養基上都能很好地生長和產孢子,但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后,就只長菌絲而不長孢子。第二,所用無機鹽的濃度要適量,不然也會影響孢子量和孢子顏色。第三,要注意孢子培養基的pH和濕度。生產上常用的孢子培養基有:麩皮培養基、小米培養基、大米培養基、玉米碎屑培養基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食鹽等配制成的瓊脂斜面培養基。大米和小米常用作霉菌孢子培養基,因為它們含氮量少,疏松、表面積大,所以是較好孢子培養基。大米培養基的水分需控制在21%-50%,而曲房空氣濕度需控制在90%-靠前。湖南培養基消毒 培養基制備器

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