培養基的化學成分包括水、無機鹽、碳源、氮源(生長因子)等。(1)碳源:能為微生物的代謝提供碳元素的物質。如CO2、NaHCO3等無機碳源;糖類、石油、花生粉餅等有機碳源。異養微生物只能利用有機碳源。單質碳不能作為碳源。(2)氮源:能為微生物的代謝提供氮元素的物質。如N2、NH3、NO3-、NH4+(無機氮源)蛋白質、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有機氮源)等。只有固氮微生物才能利用N2。培養基還要滿足微生物生長對PH、特殊營養物質以及氧氣的要求。例如,培養乳酸桿菌時需要在培養基中添加維生素,培養霉菌時須將培養基的pH調至酸性,培養細菌是需要將pH調至中性或微堿性,培養厭氧型微生物是則需要提供無氧的條件。攪拌轉速異常需檢查電機碳刷磨損情況。上海培養基制備器品牌
培養基配置原則:滅菌處理,要獲得微生物純培養,必須避免雜菌污染,因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養基而言,更是要進行嚴格的滅菌。對培養基一般采取高壓蒸汽滅菌,一般培養基用1.05kg/cm2,121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中,長時間高溫會使某些不耐熱物質遭到破壞,如使糖類物質形成氨基糖、焦糖,因此含糖培養基常在0.56kg/cm2,112.6℃15-30分鐘進行滅菌,某些對糖類要求較高的培養基,可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合;長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結合形成難溶性復合物而產生沉淀。上海培養基制備器品牌運行噪音增大需潤滑軸承或緊固松動部件。
微生物檢驗培養基制備的要點:對LST培養基進行滅菌時,發酵管內可能存在氣泡。為了防止發酵管內形成氣泡,可以采取以下措施:倒置的小管充滿培養基,不留氣泡,然后加入含有LST的試管中。在關閉殺菌鍋的排氣閥之前,將鍋內的氣體排空。試管塞不要塞得太緊。使用硅膠塞時,請勿使用橡膠塞。不可過早打開殺菌鍋,等殺菌鍋內的氣壓和溫度降到與室溫相同或相差不大時再打開殺菌鍋。如果按照以上方法操作還有氣泡,可以用水作為培養基組的對照試驗。如果培養基組有氣泡,對照組沒有氣泡,可以確定培養基本身原因。
微生物檢驗培養基制備的要點:培養基倒入平板,將滅菌溶化的培養基冷卻至五十度后,倒入無菌干燥的培養皿中。微生物培養基制備的溫度不能太高,否則培養皿內蓋容易形成過多的冷凝水;溫度太低,中海培養基容易凝固成塊狀,不能做成平板。倒平板時,要靠近酒精的火焰以防止外來細菌落入盤中。左手托住培養皿,右手托住三角瓶底部。用小指和手掌拉出錐形瓶的棉塞,燒灼燒瓶口,用拇指和食指在培養皿蓋上打開一條縫,直到燒瓶口剛好伸手進去,倒入培養基,直到底部被覆蓋。不要超過培養皿高度的三分之一,迅速蓋上蓋子,放在桌子上,輕輕旋轉培養皿,使培養基分布均勻,凝結后即可。高溫下長時間停留會導致瓊脂過度凝固、糖類焦化或蛋白質變性。
微生物檢驗培養基制備的要點:培養基擺斜面,滅菌完成后,將試管中的中海瓊脂培養基放在木棒或玻璃棒上,同時它很熱,并且有適當的坡度。冷卻后使瓊脂凝固并變成斜面。斜面長度不超過試管的二分之一。微生物培養基質檢,檢驗培養基滅菌后,發現有破損,浸水,顏色異常,棉塞被培養基污染。所有這些都必須丟棄,不能重復使用,并確定其很終pH值。無菌檢查和效果檢查也是必需的。無菌檢查是取1~2瓶無菌培養基,37℃孵育一兩天,確認無細菌生長;效果檢查是將標準菌株接種到相關培養基上進行細菌檢查。動物的生長、形態和生化條件與已知條件一致。兩個條件都合格,準備好的培養基就可以使用了。程序化滅菌曲線優化能量利用,減少資源浪費。 整合攪拌系統確保瓊脂等膠體物質均勻分布。上海培養基制備器品牌
**內置冷卻系統**:部分培養基制備器配備水循環冷卻或風扇冷卻功能。上海培養基制備器品牌
制備培養基的操作要點:a.液體培養基所配制的培養基是液態的,其中的成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,液體培養基營養成分分布均勻,易于控制微生物的生長代謝狀態。b.固體培養基在液體培養基中加入適量的凝固劑即成固體培養基。常用作凝固劑的物質有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂為常用。固體培養基在實際中用得十分普遍。在實驗室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數、保藏、生物測定等。c.半固體培養基如果把少量的凝固劑加入到液體培養基中,就制成了半固體培養基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養基有時可用來觀察微生物的動力,有時用來保藏菌種。上海培養基制備器品牌